Quantificação de antiestreptolisina O, justificativa, técnica, patologias

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Egbert Haynes

O antiestreptolisina O é o anticorpo que é gerado em resposta a uma infecção causada pela bactéria Streptococcus pyogenes ou também conhecido como estreptococo beta-hemolítico do grupo A. Produz dois tipos de exotoxinas com atividade hemolítica denominadas estreptolisinas “S” e “O”..

A estreptolisina S é responsável pela beta hemólise que ocorre no ágar sangue e, embora seja tóxica para certas células do sistema imunológico, não é antigênica. Enquanto a estreptolisina O, por ser lábil ao oxigênio, é responsável pela hemólise que ocorre abaixo do ágar sangue e esta é antigênica.

Streptococcus pyogenes / Diagrama do que acontece no teste ASTO (reação de aglutinação). (Anticorpos ligados às partículas de látex que contêm o antígeno específico). Fonte: Usuário: Graham Beards [CC BY-SA 3.0 (https://creativecommons.org/licenses/by-sa/3.0))] / Alejandro Porto [CC BY-SA 3.0 (https://creativecommons.org/licenses / by-sa / 3.0)]

Portanto, quando as células do sistema imunológico interagem com a estreptolisina O, é produzida uma resposta imunológica específica, que gera a ativação dos linfócitos B. Essas células produzem anticorpos direcionados contra a estreptolisina O. Portanto, os anticorpos são chamados de antiestreptolisina O.

O Streptococcus pyogenes produz várias patologias, entre as quais estão: amigdalite, erisipela, impetigo, febre puerperal, escarlatina e septicemia. Os anticorpos antiestreptolisina O aparecem 8 a 30 dias após o início da infecção.

A maioria dessas infecções é muito comum na população, por isso é comum que as pessoas tenham anticorpos antiestreptolisina O no sangue. Títulos baixos indicam uma infecção anterior com essa bactéria, mas um título alto ou crescente indica uma infecção recente ou em andamento..

Índice do artigo

  • 1 Quantificação de anticorpos antiestreptolisina O
  • 2 Antecedentes da técnica ASTO
  • 3 técnicas
    • 3.1 - Técnica semiquantitativa
    • 3.2 - Técnica quantitativa
  • 4 Patologias com altos títulos de antiestreptolisina O
    • 4.1 Doenças autoimunes pós-estreptocócicas
  • 5 referências

Quantificação de anticorpos antiestreptolisina O

No laboratório, o título do anticorpo antiestreptolisina "O" pode ser medido por meio de um teste sorológico. O teste de antiestreptolisina O (ASTO) é baseado em uma reação de aglutinação com látex.

Pode ser feito semiquantitativamente, reportando em cruzamentos ou o título também pode ser quantificado. É normal e não significativo encontrar valores até 200 UI / ml ou unidades Todd / ml. Acima desse valor é considerado positivo e clinicamente significativo..

Este teste não exige que o paciente esteja em jejum. O soro é utilizado como amostra, ou seja, o sangue do paciente é extraído e colocado em um tubo sem anticoagulante, a seguir é centrifugado para a obtenção do soro.

Base da técnica ASTO

A técnica utiliza partículas de látex como suporte para fixar o antígeno da estreptolisina O. As partículas do antígeno absorvidas reagem com o soro do paciente. Se o paciente tiver anticorpo antiestreptolisina O, eles se ligarão ao antígeno anexado à partícula de látex.

Essa ligação causa aglutinação que é macroscopicamente visível. A intensidade da reação é diretamente proporcional à concentração de anticorpos presentes.

Técnicas

- Técnica semiquantitativa

A intensidade da reação pode ser semiquantificada em cruzamentos. Para fazer isso, uma placa de reação sorológica é retirada e colocada:

50 µl de soro e 50 µl de reagente ASTO. Misture bem com um palito de madeira e coloque na batedeira por 2 minutos. Ver. Se um rotador automático não estiver disponível, deve ser feito manualmente.

Interpretação

Suspensão livre de grumos (uniforme): negativo

1. + = reação fraca

2. ++ = ligeira reação

3. +++ = reação moderada

4. ++++ = reação forte

Os soros positivos com 3 e 4 cruzamentos podem ser quantificados.

- Técnica quantitativa

Para a quantificação do título, são feitas diluições em série 1: 2, 1: 4: 1: 8, 1:16..

Para isso, proceda da seguinte forma: 4 tubos de ensaio ou tubos Kahn são colocados e 0,5 ml de soro fisiológico são colocados em todos eles. Em seguida, 0,5 ml de soro do paciente é adicionado ao primeiro tubo. Combina bem. Esse tubo corresponde à diluição 1: 2.

Posteriormente, 0,5 ml são transferidos para o tubo 2 e bem misturados. Este tubo corresponde à diluição 1: 4 e assim por diante, até que a diluição desejada seja alcançada.

Pegue 50 µl de cada diluição e reaja com 50 µl do reagente ASTO em uma placa de aglutinação, conforme explicado na técnica semiquantitativa.

Interpretação

A diluição mais elevada em que se observa aglutinação visível é tida em consideração. Os cálculos são realizados da seguinte forma:

ASTO = inverso da maior diluição positiva x sensibilidade da técnica (constante).

Exemplo: Paciente com reação positiva até 1: 8

ASTO = 8 x 200 IU / ml = 1600 IU / ml ou Unidades Todd / ml.

Valor de referência

Adulto normal: até 200 UI / ml

Crianças normais: até 400 UI / ml

recomendações

É aconselhável montar um controle positivo e um negativo com os pacientes para garantir que o reagente está em ótimas condições. Se o controle positivo não aglutina ou o controle negativo aglutina, o reagente não pode ser usado..

A reação deve ser interpretada após 2 minutos, após este tempo não é válida se houver aglutinação. É sobre falsos positivos.

Os soros hiperlipêmicos interferem na reação. Eles podem dar falsos positivos.

Um valor ASTO isolado não ajuda muito. Deve ser acompanhado pelos sintomas.

Além disso, é aconselhável realizar pelo menos 2 medições de ASTO quando houver suspeita de febre reumática ou glomerulonefrite pós-estreptocócica, para demonstrar o aumento dos níveis de antiestreptolisina O e, assim, confirmar o diagnóstico..

Patologias com altos títulos de antiestreptolisina O

Os anticorpos anti-estreptolisina aumentam após sofrer uma infecção por Streptococcus pyogenes o Estreptococo ß-hemolítico do Grupo A.

Estes incluem: faringite aguda, escarlatina, impetigo, erisipela, febre puerperal e septicemia.

Alguns pacientes que sofreram infecções estreptocócicas recentes ou recorrentes podem desenvolver doenças autoimunes como sequela ou complicação da infecção pós-estreptocócica, como glomerulonefrite aguda e febre reumática..

Doenças autoimunes pós-estreptocócicas

Febre reumática

É uma complicação ou sequela inflamatória que pode surgir 1 a 5 semanas após uma infecção estreptocócica. Os títulos de antiestreptolisina O aumentam significativamente 4 a 5 semanas após o início da doença.

Um alto título de ASTO orienta o diagnóstico, mas não está relacionado com a gravidade da doença e sua diminuição não implica em melhora.

Os anticorpos antiestreptolisina O apresentam reação cruzada contra o colágeno e as fibras musculares, afetando determinados órgãos (coração, pele, articulações e sistema nervoso, entre outros).

Esta complicação ou sequela causa envolvimento cardíaco, febre, mal-estar geral, poliartrite migratória não supurativa, coreia, etc..

Glomerulonefrite aguda

A glomerulonefrite aguda é uma sequela não supurativa que ocorre devido à deposição de complexos antígeno-anticorpo na membrana basal glomerular.

A formação e circulação de complexos antígeno-anticorpo (ag-ac) gerados por infecções estreptocócicas podem levar a alterações exsudativas e inflamação dos glomérulos, com proteinúria e hematúria.

Esses complexos ag-ac são depositados no glomérulo e ativam a cascata do complemento, resultando em dano endotelial glomerular. Portanto, é considerada uma doença autoimune, uma vez que o sistema imunológico do indivíduo danifica os próprios tecidos..

Os anticorpos antiestreptolisina O são muito altos e os níveis de complemento são baixos.

Referências

  1. Wiener Laboratories. Látex ASO. 2000. Disponível em: wiener-lab.com.ar
  2. Colaboradores da Wikipedia. "Anti-estreptolisina O." Wikipédia, a enciclopédia livre. Wikipedia, The Free Encyclopedia, 23 de janeiro de 2019. Web. 19 de julho de 2019.
  3. Kotby A, Habeeb N, Ezz S. Título de antistreptolisina O na saúde e na doença: níveis e significância. Pediatr Rep. 2012; 4 (1): e8. Disponível em: ncbi.nlm.nih
  4.  Sen E, Ramanan A. Como usar o título de antiestreptolisina O. Arch Dis Child Educ Pract Ed. 2014; 99 (6): 231-8. Disponível em: ncbi.nlm.nih
  5. Koneman E, Allen S, Janda W., Schreckenberger P, Winn W. (2004). Diagnóstico microbiológico. (5ª ed.). Argentina, Editorial Panamericana S.A.
  6. González M, González N. 2011. Manual of Medical Microbiology. 2ª edição, Venezuela: Direção de mídia e publicações da Universidade de Carabobo.

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