O alça bacteriológica É um instrumento de trabalho utilizado por microbiologistas para a semeadura de culturas microbianas (bactérias ou fungos). Talvez seja o instrumento mais utilizado por esses profissionais..
Seu uso parece simples, mas na realidade requer muito treinamento. Antes de iniciar a semeadura, a alça deve ser esterilizada no bico de Bunsen, para então retirar o inóculo microbiano que pode vir de uma cultura líquida ou sólida..
Depois de coletado o inóculo, ele pode ser depositado em meio líquido ou semeado em meio sólido. Após cada procedimento, a alça é esterilizada novamente. O cabo também serve para fazer esfregaços microbianos em uma lâmina.
A alça bacteriológica tem muitos nomes, incluindo: alça ou alça de platina, alça de inoculação ou alça de semeadura, porém seu nome real é alça de Kohle..
O material com o qual o cabo é feito geralmente é uma liga de níquel-cromo (nicrômio) ou também de platina. Outra variedade disponível no mercado são as alças bacteriológicas descartáveis de plástico..
Por outro lado, existem vários tipos de alças bacteriológicas, cada uma desempenhando uma função dentro das tarefas desempenhadas por um microbiologista. A escolha da alça vai depender do que precisa ser feito.
Por exemplo, para realizar um estriado por esgotamento para isolar um microrganismo, utiliza-se a alça de platina que termina em um anel fechado, independentemente de estar calibrado ou não..
Ao passo que, se for para semear uma amostra de urina, onde é importante quantificar UFC, é necessário usar o loop calibrado. Da mesma forma, para inocular testes bioquímicos, que precisam ser semeados por punção, a alça da agulha é imprescindível. É importante que o cabo seja manuseado por pessoal treinado.
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Os loops bacteriológicos são compostos de dois extremos. Uma extremidade corresponde à alça ou base, enquanto a outra é a própria alça.
A base serve para segurar a alça durante o manuseio. Geralmente é metálico, mas possui isolante térmico para evitar que o operador se queime ao esterilizar a ponta do cabo no isqueiro. Mede aproximadamente 20 cm, embora possa ser mais longo. Possui rosca para ajustar a alça.
É o fim funcional, ou seja, é a parte que entra em contato com os microrganismos e com os meios de cultura. Consiste em um fio fino que é inserido na base.
A alça pode ser feita de nicromo ou platina, por isso às vezes é chamada de alça de platina. Tem aproximadamente 6,5 cm de comprimento e uma bitola de aproximadamente 0,20 mm. A alça com alça pode medir 26,5 cm. As medições podem variar de fabricante para fabricante.
Existem vários tipos de alças bacteriológicas e cada uma tem um uso específico. Os tipos de alças são os seguintes: alça em forma de anel calibrada, alça em forma de anel não calibrada, alça reta ou de agulha, alça espatulada, alça em forma de “L” e alça de ponta afiada.
Por outro lado, as alças podem ser permanentes ou descartáveis. Os de uso permanente são esterilizados no isqueiro, sendo reutilizáveis e muito duráveis. Embora os descartáveis sejam esterilizados de fábrica, eles são usados apenas uma vez e são descartados..
É o cabo mais utilizado no laboratório de microbiologia. É utilizado para retirar um inóculo de uma suspensão microbiana (meio líquido) ou de uma porção de colônia (meio sólido), para ser semeado em outro meio de cultura, seja um teste bioquímico ou um meio mais enriquecido ou seletivo, conforme o caso. . Também é útil para fazer esfregaços microbianos em uma lâmina.
Com esse tipo de alça, o inóculo inicial pode ser semeado. Também é projetado para que deslize suavemente sobre o ágar, sem danificá-lo. Claro, isso requer uma equipe treinada para lidar com a técnica de semeadura, aplicando a força e os movimentos corretos para fazer um bom estriamento..
Com esta alça, várias técnicas de semeadura podem ser realizadas. Por exemplo, meios sólidos em placas de Petri são geralmente semeados por exaustão (existem várias técnicas, veja o vídeo 1).
Essa técnica visa obter colônias isoladas para poder estudá-las e identificá-las, principalmente quando a amostra é polimicrobiana, ou seja, a cultura não é pura (contém mais de um tipo de microrganismo)..
Em vez disso, as cunhas são plantadas em zigue-zague simples para obtenção de massa bacteriana, não sendo necessário, neste caso, isolar colônias..
Às vezes, eles também são usados para tirar certas amostras. Por exemplo, Rojas e outros usaram a alça bacteriológica para coletar amostras de tecido vaginal raspado de ratos..
Este identificador, como o próprio nome indica, é calibrado para receber uma quantidade específica de suspensão microbiana. É utilizado quando é necessário que o inóculo cumpra o que é padronizado na técnica..
Por exemplo, é muito comum o plantio de culturas de urina. Neste caso, um loop calibrado de 0,01 ml e um de 0,001 ml pode ser usado..
Deve-se observar que os cabos calibrados possuem uma margem de erro, que varia de acordo com o ângulo com que a amostra é retirada e o tamanho da boca do recipiente..
Se a alça de 0,001 ml for inserida verticalmente em um recipiente com uma boca pequena (≤ 7 mm), a quantidade tomada será 50% menor do que o desejado.
Isso ocorre porque quanto menor o diâmetro da boca do recipiente, maior a tensão superficial e, portanto, as forças de adesão entre (vidro - líquido) aumentam. Isso faz com que a carga de líquido levado pela alça seja menor.
Ao passo que, se for tomado em um ângulo de 45 ° em um recipiente com uma boca larga (≥ 22 mm), pode-se coletar 150% a mais do que a quantidade necessária. Nesse caso, a tensão superficial é menor e as forças de coesão vidro / plástico diminuem, enquanto a força de coesão líquido-líquido aumenta..
Por causa do acima, outros métodos para a quantificação de unidades formadoras de colônias são às vezes preferidos para culturas de urina..
Também é chamado de identificador de thread. É usado para inocular certos testes bioquímicos, principalmente aqueles que precisam ser semeados pela técnica de punção. Por exemplo, meios semissólidos que são preparados na forma de um bloco, como: meio SIM, MIO e O / F.
Além disso, no caso de MIO e SIM que avaliam a motilidade, é imprescindível que a punção seja realizada com alça de agulha, uma vez que a interpretação de uma motilidade positiva ocorre quando a bactéria cresce em direção às laterais do inóculo inicial..
Um teste inoculado com um loop loop pode falsificar os resultados (falso positivo). Por isso, neste tipo de semeadura, deve-se ter cuidado para que o furo seja único, e ao retirá-lo saia no mesmo sentido em que entrou.
Outro teste que deve ser semeado com agulha, embora seja preparado em forma de cunha, é o Kligler. Neste teste, não é recomendado que o oxigênio penetre profundamente no ágar, pois um meio pobre em oxigênio é necessário para que certas reações químicas ocorram. Esta alça também é usada para tocar uma colônia específica a fim de fazer uma subcultura.
A maioria dos microrganismos dá colônias moles e fáceis de eliminar. No entanto, existem alguns agentes microbianos cujas colônias são duras e secas, por exemplo, micobactérias em geral e alguns fungos. Nestes casos, é útil usar o cabo espatulado.
Seu uso mais frequente é para chimar culturas de fungos, especialmente bolores..
É útil para tirar colônias muito pequenas presentes em culturas polimicrobianas, a fim de ser capaz de subcultivá-las..
O cabo deve ser esterilizado antes e depois do uso. Para esterilizar a alça bacteriológica do isqueiro, proceda da seguinte forma: o cabo deve ser colocado no topo da chama, adotando a posição o mais vertical possível, de forma a esterilizar da ponta para cima..
Quando o filamento fino fica vermelho brilhante, pode-se dizer que é estéril. Para utilizá-lo, ele é resfriado e a amostra escolhida é retirada. (Veja o vídeo 2).
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